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电泳转移缓冲液的作用,你了解多少?

发布时间:2022-02-21   点击次数:172次
  在生化实验时做DNA或蛋白质电泳时,都会用到缓冲剂,电流通过水(H2O)时,在阳极发生氧化反应,生成氧气以及氢离子;在阴极发生还原反应,生成氢气以及氢氧根离子。长时间电泳将会使阳极变酸,阴极变碱。一个好的缓冲系统应该有较强的缓冲能力,使溶液两极的pH保持基本稳定。
 
  电泳转移缓冲液在电泳过程中的一个作用是维持溶液的pH稳定。电流通过水(H2O)时,在阳极发生氧化反应,生成氧气以及氢离子;在阴极发生还原反应,生成氢气以及氢氧根离子。长时间电泳将会使阳极变酸,阴极变碱。一个好的缓冲系统应该有较强的缓冲能力,使溶液两极的pH保持基本稳定。电泳缓冲液的另一个作用是使溶液带有一定的导电性,以利于DNA分子的迁移。DNA为碱性物质,在电泳时带负电荷,由负极向正极迁移。
 
  电泳转移缓冲液还有一个组分是EDTA,目的是螯合Mg2+等离子,防止电泳时激活DNA酶。由于核酸酶需要这些离子,EDTA可以将这些离子牢牢抓住,避免核酸降解。但要注意的是,镁离子同时是很多酵素的辅助因子,如限制酶、DNA聚合酶等等,因此EDTA的浓度一般不会太高。
 
  电泳转移缓冲液电泳时正极与负极都会发生电解反应,正极发生的是氧化反应,负极发生的是还原反应,长时间的电泳将使正极变酸,负极变碱。一个好的缓冲系统应有较强的缓冲能力,是溶液两极的pH保持基本不变。电泳缓冲液的另一个作用是使溶液具有一定的导电性,以利于DNA分子的迁移。

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