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β-gal 报告基因染色试剂盒

更新日期:2021-07-12

访问量:55

厂商性质:生产厂家

所在城市:上海市

简要描述:
大肠杆菌中的LacZ基因编码产物为β-半乳糖苷酶(β-galactosidase,β-gal),β-gal较稳定,能抵抗蛋白酶的水解,并可催化其底物X-gal产生蓝色产物,所以可以方便地检测出LacZ基因的表达。因而,LacZ基因或β-gal常用来作为报告基因,检测表达载体介导的基因转移表达效率,此外,也常用于基因启动子活性的研究。
品牌自营品牌供货周期现货
应用领域医疗卫生,生物产业

 

我公司的β-半乳糖苷酶(β-gal)报告基因染色试剂盒利用X-gal作为底物,配合试剂盒内提供的其他试剂,可对固定后的细胞、组织冰冻切片中的β-gal进行显色,阳性结果表现为蓝色。

包装清单:

产品编号产品名称规格
SJ1233

β-半乳糖苷酶(β-gal)

报告基因染色试剂盒

100ML
说明书一份

保存条件:

-20℃保存,一年有效。其中X-Gal溶液需避光保存。

产品组成:

产品名称编号名称

β-半乳糖苷酶(β-gal)

报告基因染色试剂盒

SJ1233-A试剂A
SJ1233-B试剂B
SJ1233-C试剂C
SJ1233-D试剂D(X-gal)
SJ1233-E试剂E(10× PBS)

使用方法:

使用前先将10 × PBS用去离子水稀释至1× PBS。

染色工作液需现配现用,配制方法如下:

名称用量
试剂(A)25 ul
试剂(B)25 ul
试剂(C)25 ul
试剂D(X-gal)125 ul
试剂E(1× PBS)2.3 ml
总量2.5 ml

1、细胞样品染色

1)培养的贴壁细胞处理完成后,用4%的多聚甲醛固定10分钟后,用PBS洗三次,每次5分钟,去除多余的PBS;

2)加入适量的染色工作液,放入37℃温箱孵育1-24小时(35mm培养皿或6孔板一般使用1.5-2.0ml/皿(孔),其他规格的培养皿或培养板可依据培养面积的大小适量增加或减少染色液的量);

3)在显微镜下观察,当染成蓝色的细胞颜色适中时,去除染色液,用1× PBS洗三次。

4)加入适量1× PBS,镜下观察、拍照(染色后的标本可在4℃保存一周)

2、组织冰冻切片染色

1)组织冰冻切片先用去离水洗涤3次,每次5分钟,去除OCT胶;

2)用PBS洗涤切片3次,吸除PBS;

3)滴加染色工作液;

4)37℃孵育1-24小时,直至切片中的细胞的颜色变蓝。孵育过程最好在温盒中进行,以防止染色液蒸发。

 

5)吸除染色工作液,用PBS洗涤切片3次,每次5分钟。  

6)水性封片剂封片后,镜下观察。染色后的标本片在4℃可保存数天。

3、小组织块染色

1)组织块在4%的多聚甲醛固定液中充分固定后,用自来水冲洗尽量去除固定剂;

2)用PBS浸泡组织块5-10分种;

3)将组织块转移至染色液中,37℃孵育1-24小时(染色液的用量尽量大于组织块体积的10倍);

4)组织块中出现蓝色着色后,去除染色液,PBS洗涤三次,每次5分种。

5)对组织进行拍照,或将组织块进行冰冻切片后镜下观察。 

注意事项:

1、在石蜡包埋的过程中β-半乳糖苷酶可能失活,从而造成染色失败,因此本试剂盒不建议用于石蜡切片的检测。如果一定要用于石蜡切片的检测,建议自行对实验条件进行一定的优化。

2、染色时间较长时,请在温盒中进行,或是增加染色液的量,以防染色液蒸发变干。

   3、染色后应及时观察、拍照。放置过久由于蓝色产物的扩散,可能会出现部分假阳性。

备注:

          产品信息可能会有优化升级,请以实际标签信息为准。

 本产品仅供科研使用。请勿用于医药、临床诊断或治疗,食品及化妆品等用途。请勿存放于普通住宅区

 

 为了您的安全和健康,请在实验过程中做好防护工作。

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