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3分钟带你学会HE染色试剂盒的操作使用

发布时间:2022-10-14   点击次数:84次
  HE染色试剂盒的具体操作步骤如下:
 
  1、取材,固定:固定液——甲醛(福尔马林)
 
  从人或动物新鲜尸体上取下组织块投入预先配好的固定液中使组织、细胞的蛋白质变性凝固,以防止细胞死后的自溶或细菌的分解,从而保持细胞本来的形态结构。
 
  2、修剪,脱水,透明:脱水剂——酒精
 
  透明剂——二甲苯
 
  不同组织固定时间不同,固定成功后需要修剪25px*25px*5px,放入包埋盒中,流水冲洗30分钟。至于不同浓度的酒精脱水,一般用由低浓度到高浓度酒精作脱水剂,逐渐脱去组织块中的水份。再将组织块置于既溶于酒精,又溶于石蜡的透明剂二甲苯中透明,以二甲苯替换出组织块的中酒精,才能浸蜡包埋。
 
  3、浸蜡,包埋:石蜡
 
  将已透明的组织块置于已溶化的石蜡中,放入溶蜡箱保温。待石蜡*浸入组织块后进行包埋,冷却凝固成块即成。包埋好的组织块变硬,才能在切片机上切成很薄的切片。
 
  4、切片、展片、烤片:
 
  将包埋好的蜡块固定于切片机上,切成薄片,一般为5—8微米厚。切下的薄片往往皱折,要放到加热的水中烫平,再贴到载玻片上,放45℃恒温箱中烘干。
 
  5、染色前,须用二甲苯脱去切片中的石蜡,再经由高浓度到低浓度酒精,最后入蒸馏水,就可染色。
 
  苏木精是一种碱性染料,可将细胞核和细胞内核糖体染成蓝紫色,被碱性染料染色的结构具有嗜碱性。伊红(Eosin,E)是一种酸性染料,能将细胞质染成红色或淡红色,被酸性染料染色的结构具有嗜酸性。

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