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组织固定液的制备方法,知道的人少之又少!

更新时间:2023-04-10   点击次数:1287次
  组织固定液是一种用于固定生物组织的液体,通常用于制备组织切片或制备组织样本以进行显微镜分析。常见的成分是甲醛和乙醇,它们可以固定细胞和组织中的蛋白质和核酸,防止它们在处理和保存期间变性或降解。此外,其他成分也可能被添加到组织固定液中以达到特定的目的。
 
  下面将对常用的组织固定液的制备方法进行简要的分析:
 
  1.甲醛固定液制备方法
 
  甲醛固定液是常用的组织固定液之一。制备方法如下:
 
  (1)将甲醛(37%)加入PBS缓冲液中,配制成4%的甲醛溶液;
 
  (2)将甲醛溶液加热至60℃,然后加入适量的PIPES(pH7.2)缓冲液并混合均匀;
 
  (3)调整pH值至7.2,加入适量的氯化钠和EDTA,混合均匀。
 
  2.石蜡固定液制备方法
 
  石蜡固定液适用于石蜡嵌入组织切片。它的制备方法如下:
 
  (1)将甲醛、异丙醇和氯仿混合在一起;
 
  (2)将混合液加入石蜡中,并用石蜡溶剂将其溶解;
 
  (3)将组织样品置于石蜡中,不断震动以充分浸泡,并在微波炉中进行热处理;
 
  (4)将组织样品悬浮在石蜡中,以便于切片和观察。
 
  3.乙醇固定液制备方法
 
  乙醇固定液是另一种常用的组织固定液,其制备方法如下:
 
  (1)用PBS缓冲液将70%乙醇稀释为50%乙醇溶液;
 
  (2)在肝素化管中滴加适量的50%乙醇溶液;
 
  (3)将反应组织样本放入管中,将其浸泡在50%乙醇液中,并用肝素化管封住。
 
  总之,不同的固定液适用于不同类型的生物试样,并有不同的操作步骤。选择合适的固定液并在正确的条件下操作是制备高质量组织切片或组织样本的关键。