抗荧光衰减封片剂的作用和使用方法介绍
更新时间:2021-10-13 点击次数:1144次
抗荧光衰减封片剂是在进行荧光显微镜观察时,用于对荧光组织和细胞样品的封片。封片剂以高纯度甘油为介质,内含抗荧光淬灭剂,有强烈的抗荧光衰减作用。样品最大限度延长荧光持续时间和维持荧光发光强度,同时封片剂中的其它成分有助于保持组织抗原抗体处于结合状态,适用于所有光谱范围的荧光,能用于各种组织、细胞免疫荧光染色的自发荧光消除,特别适用神经组织自发荧光淬灭。
许多组织会产生可透过各种波长滤光片的内源性自发荧光,显著干扰抗体标记荧光观察甚至导致荧光组化染色失败。抗荧光衰减封片剂中的离子可用碰撞方式捕获自发荧光光源分子发出的电子,阻止该电子从激发态回归基态并阻止能量释放,从而淬灭自发荧光。采用优化的孵育时间,可以最大限度地消除自发荧光而不明显影响抗体标记的荧光。封片溶液成分无特殊毒性。如盖玻片脱落或错位,可将玻片放入PBS中取出盖玻片,重新用封片剂封片。也可将适量封片剂直接加到细胞培养孔内,进行荧光观察。
抗荧光衰减封片剂使用方法:
1.吸去载玻片上的液体,略微晾干残留液体。
2.取封片剂滴加在载玻片样品处,也可直接加到细胞培养孔内观察。
3.盖上盖玻片,轻轻压盖玻片,用滤纸小心吸除盖玻片周围多余液体,室温放置数分钟。
4.直接进行荧光显微镜观察。