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使用细胞冻存液,你需要注意这些事项!

发布时间:2021-06-30   点击次数:112次
  为了将每一种有生命的细胞较好的保存其原有的细胞特性或者长久的保存种质资源,实验人员往往将细胞用特殊配置的细胞冻存液保存,使得细胞暂时脱离生长状态,等到实验需要的时候再从液氮中取出复苏应用。
 
  细胞冻存液冻存细胞健康程度一般要求活细胞在95%以上,细胞活力差的在冻存后的成活机率很小,因此,一定要在细胞旺盛分裂时期冻存。冻存液冻存需要一段时间,如果这段时间冻存管倾斜,液体容易流到管口,很容易在后续的操作中造成污染。具体操作时,冻存管直立起来放在冰箱里,这样不容易造成污染。同时冻存细胞的时候,一定加上封口膜,这样可以避免复苏的时候,水浴箱里的水进入盖子的缝隙中。冻存管外面用封口膜封上后,最好再用白胶布再封一下。这样可以防止细胞复苏时,封口膜崩裂,水浴箱中的水进入冻存管。
 
  细胞冻存液的使用注意事项:
 
  1.使用前,不需要进行高压灭菌,它本身就有灭菌的作用。高压灭菌反而会破坏它的分子结构,以至于降低冷冻保护效果。
 
  2.在常温下,DMSO对人体有害,故在配制时最好戴上手套操作。
 
  3.混合DMSO要快,因为DMSO对细胞有毒性,混合之后应尽快冻存,提醒各位注意的是加入冻存液后一定要混匀,防止DMSO沉淀。
 
  4.冻存液比例培养基7:血清2:DMSO1,也有将血清比例加大的做法,有的甚至将血清提高到90%,具体浓度视经验而定。
 
  5.可以先在泡沫上打孔,把冻存管塞进去。这样降温可以慢一点,当然包上棉花也是不错的主意。
 
  6.注意定期检查液氮罐内液氮量,及时添加。

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