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3分钟了解下cck8细胞增殖检测试剂盒的操作说明

更新时间:2023-01-14   点击次数:812次
  cck8细胞增殖检测试剂盒的检测依赖于脱氢酶催化的反应,如果待测物质有氧化性或还原性,可在加CCK-8之前更换新鲜培养基,去掉药物的影响。若药物影响比较小的情况可以不更换培养基,直接扣除培养基中加入药物后的空白吸光度即可。
 
  cck8细胞增殖检测试剂盒的操作说明:
 
  1、在96孔板中接种细胞悬液(100μL/孔),通常细胞增殖实验每孔约2000个细胞,细胞毒性实验每孔约5000个细胞(具体每孔所用的细胞的数目,需根据细胞的大小,细胞增殖速度的快慢等因素决定)。
 
  2、按照实验需要,进行培养并给予0-10μL特定的药物刺激,并孵育一段时间(例如:6、12、24或48小时)。
 
  3、向每孔加入10μLCCK-8溶液。如果起始的培养体积为200μL,则需加入20μLCCK-8溶液,以此类推。
 
  4、在细胞培养箱内继续孵育1-4小时,具体时间可以通过预实验确定。
 
  5、用酶标仪测定在450nm处的吸光值,若无450nm滤光片,可以使用420-480nm的滤光片,但是450nm检测灵敏度最高。如果样品为高浑浊度的细胞悬液,可以使用大于600nm的波长,例如650nm,作为参考波长进行双波长测定。
 
  6、如果需要暂时不测定O.D值,可以向每孔中加入10μL0.1MHCl溶液或者1%w/v的SDS溶液,避光保存在室温,24小时内吸光度不会发生变化。