3分钟了解下cck8细胞增殖检测试剂盒的操作说明

　　cck8细胞增殖检测试剂盒的检测依赖于脱氢酶催化的反应，如果待测物质有氧化性或还原性，可在加CCK-8之前更换新鲜培养基，去掉药物的影响。若药物影响比较小的情况可以不更换培养基，直接扣除培养基中加入药物后的空白吸光度即可。
 

　　cck8细胞增殖检测试剂盒的操作说明：
 

　　1、在96孔板中接种细胞悬液(100μL/孔)，通常细胞增殖实验每孔约2000个细胞，细胞毒性实验每孔约5000个细胞(具体每孔所用的细胞的数目，需根据细胞的大小，细胞增殖速度的快慢等因素决定)。
 

　　2、按照实验需要，进行培养并给予0-10μL特定的药物刺激，并孵育一段时间(例如:6、12、24或48小时)。
 

　　3、向每孔加入10μLCCK-8溶液。如果起始的培养体积为200μL，则需加入20μLCCK-8溶液，以此类推。
 

　　4、在细胞培养箱内继续孵育1-4小时，具体时间可以通过预实验确定。
 

　　5、用酶标仪测定在450nm处的吸光值，若无450nm滤光片，可以使用420-480nm的滤光片，但是450nm检测灵敏度最高。如果样品为高浑浊度的细胞悬液，可以使用大于600nm的波长，例如650nm，作为参考波长进行双波长测定。
 

　　6、如果需要暂时不测定O.D值，可以向每孔中加入10μL0.1MHCl溶液或者1%w/v的SDS溶液，避光保存在室温，24小时内吸光度不会发生变化。